Full resolution (JPEG) - On this page / på denna sida - H. 6. 8 februari 1955 - Jonbyte i biokemisk industri och forskning, av Nils Lengborn
<< prev. page << föreg. sida << >> nästa sida >> next page >>
Below is the raw OCR text
from the above scanned image.
Do you see an error? Proofread the page now!
Här nedan syns maskintolkade texten från faksimilbilden ovan.
Ser du något fel? Korrekturläs sidan nu!
This page has never been proofread. / Denna sida har aldrig korrekturlästs.
108
TEKNISK TIDSKRIFT
Fig. 1. Separering av aminosyror enligt
Partridge"; AK aktivt kol, A anjonbytare,
AD Dowex 2 (stark anjonbytare), KP
kat-jonbytare av polystyrentyp, KZ Zeo-Karb
215.
eluera med natriumcitratbuffert med stigande
pH. De bästa resultaten erhålles enligt
sistnämnda metod. Liknande försök i större skala har
utförts av Åquist8 vid isolering av Ni5-märkta
aminosyror.
Hirs, Stein och Moore9 har utarbetat en metod
för separering av aminosyror i större mängd
(fig. 2), vid vilken de använder Dowex 50 i
am-moniumform och eluerar med ammoniumfor-
Fig. 2. Separering av aminosyror enligt Hirs, Stein &
Moore0; DX Dowex 50, AI Amberlite 1R-4B.
miat-acetatbuffert som kan avlägsnas från
elu-atet genom sublimering. Under hela processen
arbetar de vid 25°C. En liknande separering har
gjorts också av aminosyrorna i
kaseinhydroly-sat10.
Winters och Kunin11 har föreslagit en enkel
metod för separering av aminosyrorna i tre olika
grupper, sura, neutrala och basiska, samt en
uppdelning av de basiska syrorna (fig. 3). Det
saltsura proteinhydrolysatet passerar en kolonn
med den svaga anjonbytaren Amberlite IR-4B
(OH), som i första hand avlägsnar saltsyran. På
en annan kolonn med samma jonbytare
absorberas de sura aminosyrorna, medan de neutrala
och basiska passerar igenom. De sura syrorna
(glutaminsyra och asparaginsyra) elueras från
jonbytaren med 0,1 N natriumacetatbuffert med
pH 4,0.
Den från IR-4B bortgående blandningen av
basiska och neutrala aminosyror passerar en
kolonn med Amberlite IRC-50 (svag katjonbytare),
som är buffrad till pH 7,0. Arginin och lysin
absorberas, medan histidin och neutralsyrorna går
igenom. Histidin absorberas på en kolonn med
IRC-50, buffrad till pH 4,7. De neutrala syrorna
absorberas ej och uppsamlas i en fraktion för
sig. Arginin och lysin elueras med 0,1 N
saltsyra, och separering av de båda komponenterna
sker med den starka anjonbytaren Amberlite
IRA-400 (OH). Lysin absorberas nämligen på
denna men ej arginin. Lysin elueras med 0,1 N
natriumacetatbuffert.
Buffring av kolonnen är nödvändig för att
förhindra hydrolys av jonbytarens saltform, vilket
skulle kunna medföra en höjning av pH hos
ingående lösning, så att de sura aminosyrornas
isoelektriska punkter överskrids. Då
aminosyrorna i så fall ej längre skulle föreligga i katjon-
<< prev. page << föreg. sida << >> nästa sida >> next page >>
