Full resolution (JPEG) - On this page / på denna sida - 1960, H. 15 - Arbetsbesparande analysmetoder inom mejeriindustrin, av Börje Lindqvist
<< prev. page << föreg. sida << >> nästa sida >> next page >>
Below is the raw OCR text
from the above scanned image.
Do you see an error? Proofread the page now!
Här nedan syns maskintolkade texten från faksimilbilden ovan.
Ser du något fel? Korrekturläs sidan nu!
This page has never been proofread. / Denna sida har aldrig korrekturlästs.
Kolonnkromatografi
För mer exakta aminosyraundersökningar
förslår inte papperskromatografi. Mjölkcentralen
började därför tillämpa kolonnkromatografi
enligt Moore och Stein för ca 5 år sedan.
Metoden har hög känslighet och utmärkt
reprodu-cerbarhet men har tyvärr också nackdelar. En
fullständig analys tar 7—10 dygn och håller
en person nästan helt sysselsatt. Parallella
undersökningar med elektrofores och
kromato-grafi kunde därför inte göras.
För separering av aminosyrorna i en komplex
blandning enligt den manuella metoden
använder Moore och Stein en pelare av
sulfonsyra-jonbytare i jämvikt med en buffertlösning med
pH 3,1. Tillför man ca 5 mg
aminosyrablandning vid kolonntoppen och därefter eluerar
med buffertlösningar, vilkas pH är mellan 3,1
och 5,1 får man ut de av jonbytaren
absorberade aminosyrorna en efter en.
Med en fraktionstagare tas eluatet upp i rör,
varvid det delas i ca 850 på varandra följande
fraktioner om vardera 1 ml. I varje fraktion
bestäms aminosyrahalten enligt
ninhydrinme-toden. Härvid försätts en grupp rör, t.ex. 50,
med en viss mängd ninhydrinreagens. Rören
försluts och sätts i kokande vatten under exakt
15 min. Därefter kyls de, försätts med
spädvätska och skakas. Den vid reaktionen
uppstående färgens styrka mäts i fotometer vid
570 och 460 m^.
Sedan ett år tillbaka har vi på Mjölkcentralen
emellertid byggt en automatisk
aminosyrakro-matograf enligt Moore och Stein i bruk. Den
ger en fullständig aminosyraanalys per dygn,
ocli arbetsinsatsen uppskattas till 0,3 personer
per arbetsdag. Noggrannheten blir större än
Reqcncrerinqslösningar
!_, _L
- Tri/ckluft ?5cmH20
Fig. 3. Flytschema för automatisk kolonnkromatografi; kolonn 1
regenereras, kolonn 2 arbetar och kolonn 3 vilar.
vid de manuella metoderna, analysfelet är i
bästa fall ± 0,2 % och vanligen inte större än
± 0,8 %.
Vid den automatiska apparaten har vi
vidtagit följande förändringar för att öka
analyshastigheten och noggrannheten samt minska
det manuella arbetet:
som kolonnfyllning används en mycket
finkornig jonbytare (kornstorlek 40 ± 5 fi); i den
uppnås jämvikt mycket snabbt varigenom
större strömningshastighet hos buffertlösningarna
kan tillåtas;
för att snabbt driva igenom
buffertlösningarna använder man reglerbara precisionspumpar
Fig. 1. Del av kromatogram erhållet mecl Mjölkcentralens automatiska kromatograf.
386 TEKNISK TIDSKRIFT 1960 .H. 16
<< prev. page << föreg. sida << >> nästa sida >> next page >>
